東當歸乙醇提取物對小鼠學(xué)習記憶的影響
日期:2012-12-28 10:30
摘要:目的觀(guān)察東當歸乙醇提取物對記憶障礙模型小鼠的作用效果。方法應用氫澳酸東蔑勞堿注射液(scoP)制備小鼠記憶障礙模型,采用避暗實(shí)驗、跳臺實(shí)驗、水迷宮實(shí)驗和Y型電迷宮穿梭實(shí)驗等方法觀(guān)察不同劑量東當歸乙醇提取物對記憶障礙模型小鼠的作用效果。結果與模型組比較,東當歸乙醇提取物中、高濃度組均能改善記憶障礙,作用強度類(lèi)似于石衫堿甲。結論東當歸乙醇提取物對SCOP誘導的小鼠記憶障礙具有良好的改善作用。
關(guān)鍵詞:東當歸;學(xué)習記憶;避暗實(shí)驗;跳臺實(shí)驗;水迷宮實(shí)驗
中圖分類(lèi)號:8285.5文獻標識碼:B文章編號:1008-0805 (2009 ) 08-2043-01
老年癡呆是一種異質(zhì)性疾病,具有特征性神經(jīng)病理和神經(jīng)化學(xué)改變,發(fā)病多為老年前期,但老年期的發(fā)病率更高}' } 0 65歲以上老人中明顯癡呆者約占2% -5%,而85歲以上的老人中幾乎一半患有不同程度的老年癡呆。當歸芍藥散是由當歸、芍藥、川芍、獲等、白術(shù)、澤瀉組成的傳統中藥處方,國內外文獻報道其對老年癡呆癥具有一定的治療效果fz,s7。但是當歸單味藥材對老年性癡呆療效研究報道不多。因此,本實(shí)驗主要研究東當歸乙醇提取物對小鼠學(xué)習記憶的改善作用。
1材料與儀器
1.1動(dòng)物實(shí)驗用小鼠,購于延邊大學(xué)藥學(xué)院動(dòng)物科,體質(zhì)量(20士2)g。
1.2試藥與儀器東當歸,氫嗅酸東蓑若堿注射液(SCOP)(上海禾豐制藥有限公司),石杉堿甲(河南竹林眾生制藥股份有限公司),無(wú)水乙醇為分析純,蒸餾水。YLS一3T型跳臺記錄儀(山東省醫學(xué)科學(xué)院設備站),RE一52C旋轉蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司),方型水迷宮儀(中國醫學(xué)科學(xué)院藥物研究所),Y型電迷宮儀(中國醫學(xué)科學(xué)院藥物研究所)。
2方法
2. 1東當歸乙醉提取物的制備東當歸粉碎過(guò)20目篩,準確稱(chēng)取,加人8倍量80%乙醇加熱回流提取2h,共3次,合并濾液,減壓抽濾,將濾液于水浴上減壓蒸餾至無(wú)醇味,得到當歸的乙醇提取物。
2. 2實(shí)驗藥物劑量設置東當歸高劑量為500 mg/kg,中劑量為250 m歲kg,低劑量為125 mg/kg,氫澳酸東食若注射液2 mg/kg,石杉堿甲85 },g/kgo
2. 3實(shí)驗設計對小鼠學(xué)習記憶改善作用的研究實(shí)驗分別采用避暗實(shí)驗、跳臺實(shí)驗、水迷宮實(shí)驗、Y型迷宮穿梭實(shí)驗。實(shí)驗小鼠隨機分為6個(gè)組,每組含8一10只動(dòng)物。實(shí)驗給藥劑量組分為石杉堿甲組(陽(yáng)性組),SCOP組、空白組、東當歸乙醇提取物高劑量組(東當歸A組)、東當歸乙醇提取物中劑量組(東當歸B組)、東當歸乙醇提取物低劑量組(當歸C組),連續灌胃30 d,期間所有動(dòng)物自由進(jìn)食飲水,小鼠末次給藥后除空白組外,其余各組均注射SCOP,10 min后進(jìn)行各組實(shí)驗。
2. 3.1避暗實(shí)驗采用被動(dòng)回避性條件反射儀進(jìn)行避暗實(shí)驗,將小鼠面部背向洞口放入明室,同時(shí)啟動(dòng)記錄裝置,記錄小鼠第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間,此為觸電潛伏期,并記錄5 min內小鼠進(jìn)人暗室的錯誤次數作為記憶指標,24 h后重復測試。
2.3.2跳臺實(shí)驗將小鼠放人跳臺反射箱內適應3 min,然后通以38 V交流電,小鼠受到電擊后多數跳上跳臺逃避電擊。記錄小鼠第1次跳下時(shí)間,此為觸電潛伏期,并記錄5 min內小鼠跳下次數,24 h后重復測試。
2.3.3水迷官實(shí)驗造模后10 min進(jìn)行水迷宮訓練。第1次訓練將小鼠放在安全臺附近G4處,讓其自行游上終點(diǎn)兩次,第2次訓練將小鼠放在中部G2,G3處,然后第3次訓練時(shí)讓小鼠游全程。設定時(shí)間為2 min,超過(guò)2 min不能游出者按2 min計。記錄小鼠自迷宮起點(diǎn)游至安全臺所需時(shí)間和途中進(jìn)人盲端的錯誤次數,連續測試4 do
2.3.4 Y型迷宮穿梭實(shí)驗測試前將小鼠放置起步區的反射臂中,不通電,讓小鼠在三臂中進(jìn)行探索,約2一3 min待其穩定后將小鼠抓至起步區,燈亮后2s時(shí),給予電刺激,直至小鼠最終逃到安全區后30 s,熄燈,作為一次測驗。在24 h后檢測小鼠10次訓練中的正確次數。
2. 4統計學(xué)方法應用SPSS 13. 0統計分析軟件進(jìn)行統計學(xué)處理,實(shí)驗數據以x士;表示,采用t檢驗,以尸<0.05為有統計學(xué)差異。
3結果
3.1避暗實(shí)驗測試結果各組小鼠避暗實(shí)驗潛伏期和錯誤次數比較見(jiàn)表1。
4討論
東當歸是傘形科植物,化學(xué)成分主要含揮發(fā)油、有機酸、氨基酸、維生素等多種物質(zhì),阿魏酸鈉也是當歸中有效單體成分,具有抗氧化、抗自由基、抗炎等藥理作用,有研究表明阿魏酸鈉能對抗A(3引起的小鼠學(xué)習記憶損傷,改善小鼠的學(xué)習記憶功能川。
本研究通過(guò)進(jìn)行避暗實(shí)驗、跳臺實(shí)驗、水迷宮實(shí)驗、Y型電迷宮穿梭實(shí)驗,均得出較相一致的結論,即在末次造模后,模型組與空白組比較,模型組成績(jì)明顯差于空白組,表明造模建立成功;東當歸低濃度組與模型組比較無(wú)顯著(zhù)性差異;東當歸中、高濃度組與模型組比較,成績(jì)明顯優(yōu)于模型組。其中,中濃度組效果更加明顯;東當歸中、高濃度組都與石杉堿甲組比較無(wú)顯著(zhù)性差異。以上實(shí)驗結果表明東當歸乙醇提取物中、高濃度組對記憶障礙小鼠有良好的改善作用,其作用強度類(lèi)似于石杉堿甲,為開(kāi)發(fā)臨床治療老年癡呆癥藥物提供理論依據,具有一定的研究?jì)r(jià)值。